세포 배양 시 주의사항
세포 배양 시 주의사항
(1) 특정 세포를 처음 배양할 때 먼저 세포명을 검색하여 배양액, 혈청, 첨가물, 정상소화시간, 계대시간 등 관련 정보를 이해해야 합니다. 특정 세포(예: 1차 배양 세포로), 보다 정확한 배양 방법을 얻기 위해서는 관련 문헌을 참조할 필요가 있습니다.
(2) 세포 배양에 들어갈 때 다음 단계를 엄격히 따라야 합니다.
① 셀 작동을 위한 모든 용액 및 소모품이 문제 없이 소독되고 테스트되었는지 확인합니다. 불확실한 용액과 소모품을 사용하지 마십시오. 특별한 경우가 아니면 다른 사람의 솔루션을 빌리지 마십시오.
② 옷의 소맷단을 말아 올리거나 백의의 소맷부리를 조여 주십시오.
③ 알코올 램프의 알코올 양을 확인하고 필요한 경우 보충합니다.
④ 필요한 모든 솔루션과 소모품이 손이 닿는 곳에 있는지 확인하십시오. 한 손으로 병뚜껑을 열려면 실험 전에 병뚜껑을 모두 풀어야 합니다.
⑤ 병 입구가 타지 않는 한 용액을 직접 붓지 마십시오. 붓는 데 실패하여 용액이 병 입구에 붙으면 75% 알코올을 뿌린 종이 타월로 병 입구 주변을 조심스럽게 닦고(병 입구를 만지지 마십시오) 불에 태우십시오. 불꽃.
⑥ 사용된 소모품이 작동 중 청소가 확실하지 않은 경우 제때 교체해야 합니다.
⑦ 실험이 끝난 후 제때 청소를 하고 작업장을 깨끗이 정리하고 마지막으로 75% 알코올로 테이블을 청소한다.
(3) 세포 오염 방지
① 실험용품은 오염을 방지한다. 세포 배양에 사용되는 시약, 소모품 및 장비는 철저히 세척 및 소독해야 하며, 각종 용액의 멸균에 주의해야 하며, 무균 시험이 음성인 경우에만 사용할 수 있습니다. 수술실 및 나머지 멸균 장비는 정기적으로 청소, 소독 및 멸균해야 합니다.
② 운전 중 오염을 방지한다.
③ 정전기가 발생하거나 먼지를 흡수하기 쉬운 옷은 백으로 갈아입고 세포 안으로 들어가야 한다.
④ 실험을 시작하기 전에 장갑에 문제가 없는지 확인해야 합니다. 장갑이 생물안전 캐비닛 외부의 물체와 접촉하는 한 장갑은 제때 소독해야 합니다.
⑤ 세포배양실에 입장한 후 문을 닫고 앉고 최대한 적게 걸어 생물안전 캐비닛의 에어커튼에 영향을 주지 않도록 한다. 작업 전에 75% 알코올 면봉으로 손과 병뚜껑을 닦으십시오. 사용하는 장비, 용액, 셀 등을 사전에 철저히 확인하십시오. 오염되었거나 멸균되지 않은 물품을 무균실에 가져오지 말고 무심코 사용하는 것은 물론 대규모 오염을 방지합니다.
⑥ 세포의 동작이 가벼워야 한다. 병입은 화염주변의 멸균영역에서 열어야 하며, 병입은 화염주변에 위치하여 간단한 회전과 연소가 가능해야 한다. 화염이 플라스틱 병 입구를 태우지 않도록 주의하십시오.
⑦ 실험 작업 중 생물안전 캐비닛의 칸막이는 가능한 한 낮아서 대화를 최소화해야 합니다. 재채기나 기침을 할 때 불필요한 오염을 피하기 위해 작업장을 향하지 않아야 합니다.
⑧ 병뚜껑은 오작동으로 인해 병뚜껑이 오염되는 것을 방지하기 위해 거꾸로 뒤집어 놓아야 합니다.
⑨ 옷에 알 수 없는 물체가 떨어져 세포 오염이 일어나지 않도록 개봉된 용기 위를 지나가지 마십시오.
⑩ 실험 작업 중 파스퇴르 피펫, 피펫 헤드 및 피펫의 적시 교체에주의하고 파이프 하나를 끝까지 수행하지 마십시오. 불결하거나 부정확한 물품과 접촉한 경우에는 직접 폐기해야 합니다. 실험 후에는 실험실을 깨끗하고 단정하게 유지하기 위해 제 시간에 청소해야 합니다. 마지막으로 테이블 상판은 75% 알코올로 청소해야 합니다.
(4) 세포의 교차오염 방지
① 각종 세포배양 작업을 할 때 사용하는 기구를 엄격히 구별하여야 하며 식별을 위하여 표시를 하는 것이 좋다. 작업은 순차적으로 수행되며 한 번에 하나의 셀만 처리됩니다. 여러 셀과 여러 작업을 함께 수행하면 혼동이 발생할 수 있습니다.
② 액체 교환 또는 통과 작업 중 세포가 부착된 피펫 헤드와 세포가 부착된 피펫은 시약 병의 입구에 닿지 않도록 하여 세포를 배양 배지로 가져와 다른 세포를 오염시키는 것을 방지합니다.
③ 모든 세포를 구입하거나, 다른 곳에서 도입하거나, 자체적으로 구축한 후에는 제때에 보존 및 냉동해야 합니다. 오염된 경우 세포를 소생시켜 배양을 계속할 수 있습니다.