세포 배양 배지의 종류와 방법은 무엇입니까?
동물 세포 배양은 동물의 신체에서 해당 조직을 채취하여 개별 세포에 분산(트립신 또는 콜라게나아제 사용)한 다음 적절한 배양 배지에 넣어 이러한 세포가 성장하고 증식할 수 있도록 하는 것입니다.
세포 배양 배지의 종류는 무엇입니까?
세포 배양액의 발전 이력에 따라 세포 배양액은 크게 균형염용액, 천연세포배양액, 합성세포배양액, 무혈청 세포배양액, 제한된 농도의 세포배양액 등 여러 종류로 나눌 수 있습니다. 화학 성분.
1. DMEM 세포 배양 배지
DMEM(Dulbecco의 변형 최소 필수 배지)은 MEM 배지를 기준으로 Dulbecco에서 입수합니다. 각 성분의 양을 2배로 늘려 저당(1000mg/L)과 고당(4500mg/L) 두 가지로 나눕니다. 세포가 빨리 자랍니다. 접착력이 좋지 않은 종양세포와 클론을 배양하기 위해서는 고포도당을 사용하는 것이 좋으며, 하이브리도마의 골수종 세포와 DNA로 형질전환된 형질전환 세포의 배양에 많이 사용됩니다.
2. 신경 기본 배양 배지
그것은 뉴런의 성장을 위한 기본 영양소를 제공할 수 있습니다.
3. Ipl-41 곤충 배지
Ipl-41 곤충 배지는 Spodoptera frugiperda 세포주의 대규모 확장을 위해 설계되었으며, BEVS(baculovirus expression system)에 의한 단백질 발현에도 일반적으로 사용됩니다. Ipl-41 매체는 원래 IPL 공식을 개선한 것입니다. Weiss et al.에 의해 개발되었습니다. 미국 농무부의 곤충 병리학 연구실. 스포도프테라 메도엔시스 유래 세포주의 대규모 증식에 사용되었습니다. Weiss는 기본 배지에 소태아혈청과 TPB 배지를 첨가하여 ipl-21 AE(III) 세포주의 대규모 연속 배양을 성공적으로 실현하였다.
배지는 주로 나비목 유래 세포주를 배양 및 유지하고 이들 세포주의 바이러스를 증폭하는 데 사용됩니다. Ipl-41 배지는 또한 무혈청 Spodoptera 세포에서 배큘로바이러스 재조합 단백질을 발현하는데 사용되었다.
1.1 균형 염 용액(BSS)
BSS는 주로 무기염과 포도당으로 구성됩니다. 그 기능은 세포의 삼투압 균형을 유지하고 pH 안정성을 유지하며 간단한 영양을 제공하는 것입니다. 주로 세포를 헹구고 다른 시약을 준비하는 데 사용됩니다.
현재 세포 배양에 사용되는 혈청은 주로 소 혈청이며 일부 특수 세포도 인간 혈청 및 말 혈청으로 배양됩니다. 소 혈청은 대부분의 포유류 세포에 적합하지만 특정 세포를 배양할 때 다른 동물 혈청을 사용하는 것이 더 적합하다는 점을 배제할 수 없습니다. 혈청에는 다양한 혈장 단백질, 폴리펩타이드, 지방, 탄수화물, 성장 인자, 호르몬, 무기 물질 등이 포함되어 있으며 이러한 물질은 세포 성장을 촉진하거나 성장 활성을 억제하여 생리학적 균형을 달성합니다.
1.2 합성 세포 배양 배지
합성배지란 천연배지의 조성에 따라 화학물질로 합성, 인공적으로 설계, 제조한 배양액의 일종이다. 가장 초기에 개발된 기본 배지(MEM)는 본질적으로 염, 아미노산, 비타민 및 기타 필수 영양소를 포함하는 pH 완충 등장성 혼합물입니다. 이를 바탕으로 DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 및 기타 합성 세포 배양 배지가 지속적으로 개발되었습니다.